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Post by cretiness on Jul 30, 2023 6:17:06 GMT -5
母细胞被连续稀释(1:10;第一个点,~2.5 × 10 4 个细胞固体培养基中生长。用空载体转化的BY4742细胞作为对照。c与b中相同的酵母细胞成像前在光照或黑暗条件下培养10小时。圆形图(内环,黑暗条件;外环,光照条件)显示从三个生物复制中获得的细胞周期阶段的平均分布。每个重复至少计数 100 个细胞。使用碘化丙啶对酵母细胞的 DNA 进行染色(红色)。比例尺,5 μm。d SULI介导的基因组基 因表达的内源ADE2降解的示意图。将含有 SULI 编码基 亚洲手机号码列表因和 LEU2 表达盒的 DNA 片段整合到基因组ADE2基因的 C 末端。使用 mCherry 代替 SULI 作为对照。e表达 ADE2-SULI 或 ADE2-mCherry 的酵母细胞被连续稀释(1:5;第一个点,~2.5 × 10 4 个细胞)并在光照或黑暗条件下在固体培养基中生长。 全尺寸图像 接下来我们测试了 SULI 是否可 以控制内源蛋白的稳定性。在一项原理验证研究中,我们将 SULI 编码序列整合到基因组ADE2基因的 C 末端,其产物是磷酸核糖氨基咪唑羧化酶,催化“从头”嘌呤核苷酸生物合成途径中的一个重要步骤。图 5d)。我们的结果揭示了ADE2 - SULI积累和腺嘌呤营养缺陷的光依赖性拯救,这在表达ADE2-mCherry的对照细胞中没有观察到(图 5e)。总而言之,这
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